Zellzählung: Zellzahl, Vitalität und Volumen ohne Färbung

CASY zählt Zellen und bestimmt Vitalität und Zellvolumen in einem Messlauf – ohne Färbung, mit Electrical Current Exclusion.

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CASY vivo Zellzähler auf dem Labortisch
Der CASY Zellzähler mit einer Größenverteilung auf dem Bildschirm, umgeben von den Probenarten, die er zählt: Primärzellen, Stammzellen, iPSC, MSC, PBMC, Zelllinien, Bakterien, Hefen, Algen und Blutparasiten

CASY: der vielseitigste Zellzähler

Die Suche nach dem passenden Zellzähler hat ein Ende – CASY kann alles.

Von Zelllinien und Primärzellen über PBMC und Stammzellen bis zu Hefen und Bakterien: CASY liefert bei allen Probenarten verlässliche Ergebnisse. Und weil sich die Kapillaren leicht wechseln lassen, wächst das Gerät mit Ihren Arbeitsabläufen mit.

  • Bis zu drei wechselbare Kapillaren
  • Jede Kapillare auf bestimmte Zelltypen abgestimmt
  • Kapillarwechsel in wenigen Minuten
  • Anpassbarer Aufbau für die unterschiedlichsten Proben

CASY – das Messprinzip

Messprinzip: Zellen im CASYton-Puffer strömen durch eine Kapillare zwischen zwei Elektroden im CASYcup

CASY misst die Leitfähigkeit zwischen zwei Elektroden, die eine genau definierte Pore trennt. Zellen in CASYton-Puffer erzeugen beim Durchtritt durch die Pore elektrische Impulse. Die Impulshöhe hängt unmittelbar vom Zellvolumen ab – so bestimmt CASY die Größe jeder einzelnen Zelle genau.

Für Hunderte von Kunden aus GMP- und GLP-Umgebungen rezertifizieren wir die Genauigkeit von CASY regelmäßig: die Abweichung bleibt unter ±2 %.

Vitalität bestimmen ohne Färbung

CASY verbindet Electrical Current Exclusion (ECE) mit der Pulsfeldanalyse – dem Messen des Zellsignals bei 1 MHz während des Durchtritts durch die Pore. So lässt sich die Vitalität genau bestimmen, ohne Färbung und ohne Scharfstellen.

Lebende Zellen werden mit ihrem vollen Volumen erfasst, weil ihre intakte Membran den Strom abhält.

Tote Zellen verlieren den Membranwiderstand, der Strom fließt hindurch. Gemessen wird dann nur noch das viel kleinere Volumen des Zellkerns – gut zu unterscheiden.

Electrical Current Exclusion: Der Strom fließt um vitale Zellen herum, durchdringt aber geschädigte tote Zellen – dadurch trennen sich beide in eigene Gipfel der Größenverteilung

Aggregate – kein Grund zur Sorge

CASY misst das Zellvolumen auf ±2 % genau – auch bei Aggregaten. Anders als optische Verfahren rechnet CASY volumenbasiert: Es bestimmt, wie viele Einzelzellen in jedes Aggregat passen. Der Aggregationsgrad lässt sich damit verlässlich erfassen, selbst in heiklen Fällen wie induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSC).

Das Einzige, was CASY nicht überlisten kann, ist die Statistik– CASY misst über einen weiten Konzentrationsbereich genau; die statistische Aussagekraft bleibt die einzige Grenze. Wer nur 300 Zellen zählt, erhält eine größere Streuung und Standardabweichung als bei über 1.000 oder gar 10.000 Zellen je Messung. Auch für sehr dünne Zellsuspensionen gibt es einen Weg: das gemessene Volumen lässt sich auf bis zu 3,6 ml erhöhen.

Zehn überlagerte Größenverteilungen derselben Probe, mit den Bereichen für Zelltrümmer, tote Zellen und vitale Zellen

Auf die Größe kommt es an – was das Zellvolumen verrät

Die goldene Regel von CASY: Wenn Sie nichts geändert haben, die Größenverteilung aber anders aussieht – werden Sie hellhörig. Dann wissen Sie etwas über Ihre Zellen noch nicht.

DievolumenbasierteZellgrößenverteilung von CASYsagt weit mehr als nur die Größe. Sie kann:

  • zeigen, wie einheitlich die Zellen sind
  • Aggregation erkennen und beziffern
  • auf mehrere Zelltypen in einer Kultur hinweisen
  • Aufschluss über den Zustand der Zellen geben
  • vor Verunreinigungen warnen

Einheitlichkeit der Zellen erkennen:

Schmale Gipfelstehen für sehr einheitliche Zellen – etwa unstimulierte CD4-T-Zellen oder Stammzellen aus Nabelschnurblut.

Mittelbreite Gipfelsind die häufigere Verteilung und finden sich bei vielen Zelltypen, etwa Fibroblasten oder untergäriger Hefe.

Breite Gipfel schließlich sind typisch für sehr uneinheitliche Zellen wie mesenchymale Stammzellen (MSC).

Zwei Größenverteilungen: eine Schulter am Hauptgipfel durch Aggregate, und zwei überlappende Gipfel bei einer Mischung von Zellpopulationen

Aggregate erkennen:

Ein unsymmetrischer Gipfel entsteht durch Aggregation und lässt sich mit der volumenbasierten Aggregationskorrektur von CASY leicht auswerten.

Größenverteilung, die sich nach rechts verbreitert, während sich Einzelzellen zu Klumpen aus zwei, drei und mehr Zellen zusammenlagern

Veränderungen der Zellgröße erkennen:

  • ZunehmendeVolumina, etwa bei (Baculo-)Virusinfektion oder Nahrungsmangel (rot)
  • AbnehmendeVolumina, etwa osmotisch oder durch Behandlungen (grün)
Zwei gegeneinander verschobene Größenverteilungen, die eine Zunahme des Zellvolumens zeigen

Mischungen verschiedener Zellpopulationen erkennen:

  • Mischung aus stark und schwach vertretenen Zelltypen, etwa bei Verunreinigung oder ungewollter Differenzierung von Stammzellen
  • Mischung gleich stark vertretener Zelltypen
Zwei Größenverteilungen: eine Schulter am Hauptgipfel durch Aggregate, und zwei überlappende Gipfel bei einer Mischung von Zellpopulationen

Verunreinigung des Mediums bestimmen:

Unerwartete Gipfel im Größenbereich (rot) können auf eine Verunreinigung des Mediums hinweisen. Eine Messung des reinen Mediums (grün) bestätigt den Verdacht und hilft, den Verursacher zu bestimmen.

Größenverteilung mit einem unerwarteten zusätzlichen Gipfel im kleinen Größenbereich, daneben die Kurve einer sauberen Probe

Sprechen Sie uns an und testen Sie den CASY Zellzähler und Analysator in Ihrem Labor.

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